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一、人外周血單個核細胞（PBMC）的分離1.3ml抗凝血加入3ml1×PBS進行稀釋。2.在15ml離心管內加入3ml淋巴細胞分離液，再在液面上方平鋪3ml稀釋過的抗凝血，常溫下，水平離心機600g，離心30min。3.吸取中間白膜層細胞，加入15ml離心管中，再加入10ml1×PBS混勻，常溫下，1000rpm，離心10min，棄上清，每管加入2mlMACS緩沖液重懸細胞并計數，調整細胞數量，每個樣本不超過107個細胞。4.2000rpm，離心3min，棄上清。二、磁珠分選...

1.6-8周齡雄性BALB/c小鼠；2.致敏階段：在第1、8和15天，通過腹腔注射300ul的混合液，其中包含50ugOVA和1mg氫氧化鋁溶于PBS中。3.激發階段：在第22天，開始鼻內激發。使用10mg/mL的OVA溶液，每側鼻孔滴入20μL，每天1次，連續激發7天。4.行為學評估：①撓鼻②打噴嚏③清水樣涕5.鼻粘膜的HE染色，有炎性細胞侵潤。上海達為科生物科技有限公司，位于上海長江軟件園，公司目前具備較好的生物學、醫學技術服務平臺，能夠為廣大客戶提供醫學科研樣本檢測、合...

研究背景：結直腸癌是全球五大致命癌癥之一，在中國是第二大常見惡性腫瘤。肝轉移是患者預后不良的主要原因，25%的患者初診時已有肝轉移，術后15%-25%因肝轉移復發，90%的肝轉移患者無法獲得有效治療，IV期患者5年生存率僅24%。N-糖基化修飾在蛋白質的多種功能中起關鍵作用，且與惡性腫瘤轉移相關，但目前關于結直腸癌肝轉移相關的N-糖基化蛋白質組學研究較少。研究方法：收集14例結直腸癌肝轉移患者的原發性病灶和配對肝轉移病灶樣本，經處理后進行液相色譜-質譜（LC-MS）分析。對多...

腫瘤壞死因子（TNF）是一種促炎細胞因子，對維持組織穩態至關重要。它通過與TNF受體1（TNFR1）結合，激活炎癥相關基因轉錄，調控絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）和核因子κB（NF-κB）通路，從而引發炎癥反應。不過，TNF引發的細胞凋亡和壞死性凋亡也可能導致多種炎癥性疾病。受體相互作用絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶1（RIPK1）是TNF信號通路中的關鍵節點，它能協調細胞的生存與死亡。RIPK1的支架功能可誘導炎癥和細胞存活，而其激酶功能則與凋亡和壞死性凋亡相關。近日，中國科學院上...

一、研究背景：胚胎發育中的“糖密碼”在生物學領域，蛋白質功能受多種化學修飾調節，其中糖基化修飾備受關注。不同于復雜的細胞外糖鏈，O-GlcNAc（O-連接的N-乙酰葡萄糖胺）作為一種可逆的單糖修飾，廣泛存在于RNA聚合酶II、轉錄因子等關鍵蛋白上，以及在細胞內數千種蛋白質上發揮作用，涉及從糖酵解至細胞周期、轉錄及翻譯等眾多基礎細胞活動，可能介導基因表達對環境變化的響應。哺乳動物早期胚胎發育階段，會經歷諸多代謝變化且依賴O-GlcNAc修飾相關酶存活。此前研究發現，負責添加O-...

激光共聚焦實驗，或稱為激光共聚焦顯微鏡實驗，是一種基于激光共聚焦技術的高分辨率光學成像方法。激光共聚焦技術結合了激光的高單色性和高方向性，以及共聚焦原理，實現了對樣本的高精度、高分辨率成像。在實驗過程中，激光束通過顯微鏡的物鏡聚焦到樣本的特定區域，激發該區域內的熒光物質發出熒光。隨后，熒光信號被顯微鏡的探測器收集并轉換為電信號，通過計算機處理得到樣本的共聚焦圖像。激光共聚焦實驗的注意事項涵蓋多個方面，以下是詳細介紹：1、實驗前準備樣品處理固定：根據樣品類型選擇合適的固定方法，...

乳酸是糖酵解的最終產物，作為碳源和信號分子，為腫瘤發展提供代謝、微環境和免疫基礎。最近，乳酸被重新定義為表觀遺傳學的標志，通過組蛋白修飾實現免疫重塑和腫瘤進展。然而，大多數非表觀遺傳蛋白的乳酸化及其功能尚未被充分研究。先天免疫系統通過多個模塊組成的信號級聯反應來響應入侵或細胞損傷。乳酸通過直接與MAVS結合抑制RLR信號轉導，但乳酸對先天免疫反應的胞質DNA感應的影響尚不清楚。cGAS被鑒定為感知胞質DNA并觸發先天免疫反應的關鍵酶，其活性和蛋白穩定性受翻譯后修飾的調節。泛素...